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  • 沙門氏菌檢驗步驟及注意事項:血清學試驗

    發布時間:

    2022-12-27

    作者:

    山東培養基生產廠家


    沙門氏菌檢驗步驟及注意事項:血清學試驗
     
    血清學作為鑒定的一部分,必須完成.
    實驗室必須配備沙門氏菌的多價菌體(O)和多價鞭毛(H)診斷血清.
    其中血清學分型為選作試驗項目.
    血清學試驗必須基于生化試驗的結果,不能單純以血清學實驗結果來報告最終結果.
     
    檢查培養物有無自凝性
     
    一般采用1.2%~1.5%瓊脂培養物作為玻片凝集試驗用的抗原.首先排除自凝集反應,在潔凈的玻片上滴加一滴生理鹽水,將待試培養物混合于生理鹽水滴內,使成為均一性的混濁懸液,將玻片輕輕搖動30s~60s,在黑色背景下觀察反應(必要時用放大鏡觀察),若出現可見的菌體凝集,即認為有自凝性,反之無自凝性.對無自凝的培養物參照下面方法進行血清學鑒定.
    微生物培養基的圖片
    多價菌體抗原O鑒定
    在玻片上劃出2個約1cm×2cm的區域,挑取1環待測菌,各放1/2環于玻片上的每一區域上部,在其中一個區域下部加1滴多價菌體(O)抗血清,在另一區域下部加入1滴生理鹽水,作為對照.
    再用無菌的接種環或針分別將兩個區域內的菌苔研成乳狀液.將玻片傾斜搖動混合1min,并對著黑暗背景進行觀察,任何程度的凝集現象皆為陽性反應.
    O血清不凝集時,將菌株接種在瓊脂量較高的(如2%~3%)培養基上再檢查;如果是由于Vi抗原的存在而阻止了O凝集反應時,可挑取菌苔于1mL生理鹽水中做成濃菌液,于酒精燈火焰上煮沸后再檢查.
     
    多價鞭毛抗原H鑒定
    操作同多價菌體抗原O鑒定.H抗原發育不良時,將菌株接種在0.55%~0.65%半固體瓊脂平板的中央,待菌落蔓延生長時,在其邊緣部分取菌檢查;或將菌株通過接種裝有0.3%~0.4%半固體瓊脂的小玻管1次~2次,自遠端取菌培養后再檢查.
     
    綜合以上生化試驗和血清學鑒定的結果,報告25g或25mL樣品中檢出或未檢出沙門氏菌.
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