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  • 菌株分離培養特性研究結果分析

    發布時間:

    2022-12-27

    作者:


    菌株分離培養特性研究結果分析

     
    菌株分離培養特性和鏡檢
    剖檢觀察病死羔羊肺臟組織,肉眼可見肺臟大部分呈現肉變,并伴有白色化膿灶.分離菌株在綿羊血瓊脂平板上生長為均一的灰白色、邊緣光滑、濕潤的圓形菌落,革蘭氏染色呈現陰性短小桿菌.
     
    分離菌株生化特性
    經細菌生化鑒定儀鑒定,分離株與大腸桿菌的生化反應特點一致,包括不產生氧化酶、苯丙氨酸脫氨酶、DNA酶以及硫化氫;能產生賴氨酸脫羧酶;分解乳糖,但不利用檸檬酸鹽、D-阿東醇和纖維二糖等,是大腸桿菌的可信度為99%.在麥康凱平板上生長為紅色、濕潤圓形菌落;在伊紅美蘭平板上生長為黑色帶有金屬光澤圓形菌落;革蘭氏染色鏡檢為陰性桿菌.
     
    分離株16SrRNA基因鑒定結果
    以細菌DNA為模板,PCR擴增大腸桿菌16SrRNA基因序列,經瓊脂糖凝膠電泳檢測分離株擴增出202bp大小的目的條帶.將測序序列與GenBank數據庫E.coli參考株16SrRNA基因序列進行同源性比對.結果顯示,分離株16SrRNA基因序列與E.coli參考株CP020933.1、KY906967.1、LC259015.1等相似性均為99%以上.
     
    分離株致病性試驗結果
    試驗組小鼠感染后雙目緊閉,被毛潮濕雜亂,呈腹式呼吸,瀕死小鼠表現為全身顫抖,6h內全部死亡(100%),而對照組小鼠無死亡.剖檢發現死亡小鼠肝臟腫大,邊緣有出血點,脾臟腫大變黑,肺臟充血及出血,局部出現壞死.無菌采集小鼠肺臟、肝臟、脾臟,均分離到與注射菌一致的大腸桿菌.
     
    藥物敏感性試驗結果
    按CLSI標準判斷分離菌株對青霉素、阿莫西林、頭孢拉定、鏈霉素、慶大霉素、多西環素、麥迪霉素、氟苯尼考、諾氟沙星、恩諾沙星、環丙沙星、復方新諾明、阿奇霉素和克林霉素等14種抗生素耐藥;對頭孢唑啉、丁胺卡那和多粘菌素B中度耐藥;對頭孢他啶、頭孢哌酮、氧氟沙星和米諾環素敏感.
     
    ExPEC毒力因子擴增結果
    以細菌DNA為模板,對9種ExPEC毒力因子進行PCR檢測,擴增到iutA(314bp)、fyuA(787bp)和ireA(254bp),且擴增片段序列與GenBank參考序列的相似性大于99%.未檢測到papA、sfaS、focG、hlyD、afa和vaT等基因.
     
    病理組織學觀察結果
    病死羔羊肺臟支氣管管腔充血,淋巴管擴張,周圍淋巴細胞浸潤、增生,肺臟肺泡壁毛細血管充血,肺泡腔內淋巴細胞浸潤;人工感染小鼠肺臟肺泡腔內充滿滲出物,出現肺泡性肺氣腫,肺臟血管管腔充血,淋巴細胞增生,肺泡周圍炎性細胞浸潤.
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