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  • 傷寒副傷寒沙門氏菌檢驗的標準操作程序

    發布時間:

    2022-12-27

    作者:


    傷寒副傷寒沙門氏菌檢驗的標準操作程序

    1.分離培養
    用棉棒直接劃線接種SS平板,36±1培養18-24小時,觀察菌落特征.傷寒及副傷寒沙門氏菌在SS平板上均呈無色半透明、光滑的中等菌落,菌落中心有黑心,但甲型副傷寒及部分傷寒沙門氏菌菌落無黑心.
     
    平板上若有可疑菌落,挑選出來分別接種三糖鐵斜面.將接種可疑菌的三糖鐵斜面經36±1培養18-24小時后,觀察反應情況.
    2.生化學試驗
    凡是三糖鐵反應符合傷寒、副傷寒沙門氏菌特征者,作靛基質試驗,尿素酶試驗,KCN試驗和賴氨酸脫酸酶試驗.符合者做血清學試驗.
    傷寒、副傷寒沙門氏菌三糖鐵反應結果
     
    3.血清學試驗
    抗原準備
    取三糖鐵斜面培養物作為玻片凝集試驗用的抗原.
    O抗原的鑒定
    按下列順序進行:
     
    H抗原的鑒定
    根據O抗原出現的凝集情況,選用相應的H因子血清、檢查第1相與第2相H抗原,如果第2相抗原不凝集,可用位相變異試驗檢查.
    位相變異試驗方法可采用簡易平板法:將0.5-0.7%半固體瓊脂平板烘干表面水份,取因子血清1環,滴在平板表面,待血清吸收到瓊脂內,便在血清部位的中央點種待檢菌株,培養后,在形成蔓延生長的菌苔邊緣取菌檢查.
    傷寒、副傷寒沙門氏菌抗原構造
     
    注:[]有的菌株有此抗原
    4.菌型的判定和結果報告
    綜合以上生化學試驗和血清學分型鑒定的結果,判定菌型,報告結果.
    質量控制要求
    1增菌及分離必須保證一個一支增菌管,一塊平板,禁止多人一管,多人一塊平板.2.分離平板時平板一半以上應有孤立菌落,以供挑選.
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