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  • 肉毒梭菌及肉毒毒素檢驗

    發布時間:

    2022-12-27

    作者:


    GB/T4789.12—2016食品微生物學檢驗

    肉毒梭菌及肉毒毒素檢驗

    梭狀芽孢桿菌的生物學特性
     
    1、形態與染色肉毒梭菌屬于厭氧性梭狀芽胞桿菌屬,革蘭氏染色陽性(老齡菌是陰性)
     
    約為4×1μm的大桿菌,多單在,偶見成雙或短鏈,兩側平行,兩端鈍園,直桿狀或稍彎曲芽胞為卵圓形,
     
    大于菌體寬度,位于次極端,使菌體呈匙形或網球拍狀,偶有位于中央常見很多游離芽胞.有4~8根周生鞭毛,運動遲緩,無莢膜.
     
    2、培養特性最嚴格的厭氧菌生長最適溫度:28攝氏度至37攝氏度:pH為6.8~7.6,產毒的最適pH為7.8至8.2.
     
    產毒培養溫度:不同菌型產毒的最適培養溫度不完全相同。
     
    C、D型溫度高些為宜,35攝氏度培養3d即可,而E型菌低溫度長時間培養效果較好.
     
    對營養要求不高:在普通培養基上都能生長.肉毒梭狀芽孢桿菌菌落在固體培養基表面上,形成類圓形,邊緣不整齊,約3毫米左右的菌落。
     
    菌落半透明,表面一般比較光滑也有的呈顆粒狀,界線不明顯,向外擴散。呈絨毛網狀,常常擴散成菌苔。
     
    在含有肉渣的液體或者半流動培養基中,肉毒梭菌生長旺盛且產生大量氣體,A、B、F三型表面渾濁,底部有粉狀和顆粒狀沉淀,并能消化肉塊,變黑有臭味;而C、D、E三型表明清亮,絮片狀生長,粘貼于管壁.
     
    肉毒梭狀芽孢桿菌菌落在葡萄糖鮮血瓊脂平板上,菌落較小,扁平,顆粒狀。
     
    中央低落,邊緣不規則,有的菌落還有大的溶血環.在卵黃瓊脂平板上生長,菌落及其培養基周圍表面覆蓋著特有的彩虹樣薄層,但G型沒有.
     
    肉毒梭菌的生化性狀很不規律,即使同型,也常見到株間的差異。
     
    需要用到的培養基列表如下:
    50102 采樣袋/均質袋 
    11001 庖肉培養基基礎
    11002 庖肉牛肉粒
    31005 庖肉培養基 
    11020 胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉湯(TPGYT 基礎)
    51002 胰蛋白酶
    11021 厭氧卵黃瓊脂基礎
    21001 50%卵黃鹽水懸液
    20201 革蘭氏染色液
    11022 明膠磷酸鹽緩沖液
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